Методы генетического конструирования микроорганизмов in Vivo

Содержание

Генная инженерия и клонирование, негативная евгеника и новейшие разработки в области криогеники, жизнь после смерти, удивительные способности человеческого разума, а также глобальных информационных сетей, полей, пространств и возможности их использования во благо себе и человечеству — основные темы книг, цепь которых — сделать доступной для каждого «серьезную» науку.[ . ]

Клонирование генов, расположенных в плазмидах по очевидным причинам не представляет сколь-нибудь значительных методических трудностей. В свете сказанного понятен тот факт, что на первых порах клонированию подвергались в основном гены с плазмидной локализацией. Сложнее обстоит дело в случае хромосомных генов. Для конструирования банка рекомбинантных плазмид применяется типичный арсенал известных методов генной инженерии, который в случае клонирования генов гт не имеет какой-то специфики. Специфика заключается в методах отбора искомых клонов, выборе реципиентных штаммов и векторов для клонирования.[ . ]

ГЕННАЯ ИНЖЕНЕРИЯ, генетическая инженерия — раздел молекулярной биологии, связанный с целенаправленным конструированием новых, не существующих в природе сочетаний генов с помощью генетических и биохимических методов. Г.и. открывает новые (не всегда бесспорные) пути решения проблем генетики, медицины, сельского хозяйства, биотехнологии. См. также Клонирование. ГЕННЫЕ МУТАЦИИ — см. Мутации.[ . ]

Подвижные генетические элементы | Микробиология

КЛОНИРОВАНИЕ [от гр. klon отпрыск, ветвь] — метод генной инженерии: получение особей путем бесполого размножения из одной клетки (как правило, не половой) с применением клеточной культуры. КЛЮЧЕВОЙ (тестовый) УЧАСТОК — часть территории к.-л. ранга, выбранная в качестве эталона и используемая для проведения детального исследования основных свойств компонентов, их взаимосвязи и взаимодействия [57]. Полученные детальные описания по К.у. рассматриваются как репрезентативные для территории в целом.[ . ]

В рамках генетической инженерии различают геиную инженерию и клеточную инженерию. Под генной инженерией понимают манипуляции с целью создания рекомбинантных молекул ДНК. Часто эту методологию называют молекулярным клонированием, клонированием генов, технологией рекомбинантных ДНК или просто генетическими манипуляциями. Важно подчеркнуть, что объектом генной инженерии являются молекулы ДНК, отдельные гены. Напротив, под клеточной инженерией понимают генетические манипуляции с изолированными отдельными клетками или группами клеток растений и животных.[ . ]

Поскольку возможности клонирования генов безграничны, то еще в самом начале этих исследований среди ученых возникли вопросы о природе создаваемых организмов. Одновременно были высказаны предположения о ряде нежелательных последствий этой методологии, причем эти предположения нашли поддержку и среди широкой общественности.

В частности, появились вопросы о свойствах бактерий, получивших в генно-инженерных экспериментах гены животных. Но самое главное стало заключаться в появлении опасений, что в ходе производства и манипуляций с рекомбинантными молекулами ДНК могут быть созданы генетические структуры со свойствами, непредвиденными и опасными для здоровья человека, для исторически сложившегося экологического равновесия. Тогда же начались и призывы к мораторию на генетическую инженерию. Эти призывы вызвали международный резонанс и повели к международной конференции, которая состоялась в 1975 г. в США и на которой широко обсуждались возможные последствия исследований в этой области. Затем в странах, в которых стала развиваться генетическая инженерия, были выработаны правила работы с рекомбинантными молекулами ДНК. Эти правила направлены на исключение попадания в среду обитания продуктов деятельности генно-инженерных лабораторий.[ . ]

Этапы культивирования микроорганизмов

Завершая обсуждение методов клонирования следует обратить внимание на один необычный вариант, имевший место в случае RDpn I [160]. В этом случае можно говорить о генной инженерии in vivo, реализовавшейся благодаря наличию гомологии между последовательностями фланкирующими гены rm Dpn II и г Dpn I. При трансформации Streptococcus pneumoniae— продуцента RDpn I рекомбинантной плазмидой, несущей гены rmDpn II in vivo, произошла рекомбинация с хромосомой и в результате в плазмиду перешли гены dpnC и dpnD (кассета генов Dpnl), которые заменили таким образом гены rm Dpn II (dpnM, dpnA, dpnB).[ . ]

Изучение регуляции экспрессии генов rm имеет свою специфику, выражающуюся в том, что, как уже отмечалось, исследуемая проблема в основном решается применением методов генной инженерии — клонирования соответствующих генов. Поэтому при интерпретации полученных результатов следует не упускать из виду, что формулируемые выводы относятся к регуляции экспрессии именно в новом для генов rm хозяине, а не к исходным клеткам (природном источнике клонированных генов). В связи с этим исследуемая проблема вынужденно во многом сводится к вопросам гетерологической, а учитывая специфику систем RM, и скоординированной экспрессии генов rm, что, понятно, не всегда отражает процессы происходящие в природном продуценте клонированных геиов. Эти замечания, очевидно, не относятся к переносу генов rm между штаммами одного вида.[ . ]

Известны также виды бактерий, являющиеся продуцентами антибиотиков. Бактерии используют в генной инженерии для клонирования и поддержания в них векторных молекул ДНК (плазмид) и гибридных молекул ДНК (см. раздел VI).[ . ]

Решающее прямое доказательство генетической рюли ДНК было обеспечено разработкой методов генной инженерии, создавшей возможность конструирования рекомбинантных молекул ДНК с заданными свойствами. К настоящему времени возможности генной инженерии показаны на примере клонирования многих генов самых различных организмов.

Что касается косвенных доказательств, то они известны очень давно и их несколько. Для ДНК характерна специфичность локализации в клетках, поскольку она обнаруживается только в ядрах клеток (хромосомах), митохондриях (у животных) и хлоропластах (у растений). У многих микроорганизмов ДНК локализована только в ядерной области (нуклеоиде) или в цитоплазме в виде плазмид. Для организмов каждого вида характерно определенное количество ДНК на клетку (табл. 10).[ . ]

Поиски новых способов повышения продуктивности животноводства на основе методов генетической инженерии проходят в трех направлениях, а именно: «конструирование» животных с заданными свойствами путем пересадки генов, клонирование животных путем клонирования клеток после разделения эмбрионов и трансплантаций эмбрионов.[ . ]

Следует отметить, что исследования систем RM II типа методами генанализа являются немногочисленными. Это вполне объяснимо, учитывая тот факт, что подавляющее большинство продуцентов рестриктаз относятся к таксонам, которые пока недоступны для применения генетических методов исследования. Поэтому в этом случае единственным выходом из создавшейся ситуации является применение молекулярно-генетического метода — метода генной инженерии. Учитывая большие потенциальные возможности этой методологии, в последнее время она стала основным подходом при исследовании таких вопросов как структура и структурная организация, а также регуляция экспрессии генов гш. Большой интерес представляют данные о первичной структуре, наличие которых способствует решению таких фундаментальных задач, как механизмы высокоспецифического белок-нуклеинового взаимодействия и эволюции генов рестрикции-модификации. В прикладном аспекте клонирование генов гш и исследование их структуры является базой для создания высокоэффективных продуцентов дефицитных ферментов.[ . ]

Закваски Vivo как приготовить

Источник: ru-ecology.info

Методы генетического конструирования микроорганизмов in vivo

Содержание диссертации, кандидата биологических наук, Кудрявцева, Ольга Михайловна

ВВЕДЕНИЕ ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1. Генетическая организация Bacillus anthracis 1.2. Создание рекомбинантных штаммов-продуцентов протектив-ного антигена сибиреязвенного микроба СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 2.1. Штаммы микроорганизмов, использованные в работе 2.2. Питательные среды, реактивы и лабораторные животные 2.3. Методики 2.3.1.

Элиминация плазмид 2.3.2. Определение протеолитической активности 2.3.3. Выделение плазмидных ДНК штаммов В. anthracis и Bacilus subtilis 2.3.4. Рестрикция ДНК плазмид 2.3.5. Конструирование гибридной плазмиды с клонированым геном pag сибиреязвенного микроба 2.3.6. Трансформация штаммов В. anthracis и В. subtilis 2.3.7.

Метод полимеразной цепной реакции 2.3.8. Исследование белкового состава культуральных фильтратов 2.3.9. Выделение протективного антигена из рекомбинантного штамма В. anthracis 2.3.10. Получение иммунных сывороток и специфических антител к протективному антигену 2.3.11. Реакция радиальной диффузной преципитации на средах с сибиреязвенным у-глобулином или анти-ПА антителами 2.3.12.

Реакция иммуноблота 2.3.13. Дот-иммуноанализ 2.3.14. Метод непрямого твердофазного иммуноферментного анализа 2.3.15. Определение титра антител к протективному антигену у иммунизированных животных 2.3.16. Определение стабильности плазмид in vitro и in vivo 2.3.17. Приготовление споровой взвеси и определение количества живых спор рекомбинантных и вакцинных штаммов 2.3.18.

Определение ЛД50 бациллярных штаммов для линейных BALB/c мышей 2.3.19. Определение иммуногенности рекомбинантных штаммов ГЛАВА 3. КОНСТРУИРОВАНИЕ ШТАММОВ, СОДЕРЖАЩИХ КЛОНИРОВАННЫЙ ГЕН СИНТЕЗА ПРОТЕКТИВНОГО АНТИГЕНА СИБИРЕЯЗВЕННОГО МИКРОБА 3.1. Подбор оптимальных донорных и реципиентных штаммов для генетического конструирования продуцентов протектив-ного антигена 3.2.

Оптимизация трансформационной передачи плазмидной ДНК в клетки В. anthracis и В. subtilis 3.3. Определение возможности селекции рекомбинантных клонов, синтезирующих протективный антиген на среде с сибиреязвенным у-глобулином 3.4.

Конструирование гибридных плазмид, содержащих ген синтеза протективного антигена ГЛАВА 4. ПОЛУЧЕНИЕ И ОТБОР СТАБИЛЬНЫХ РЕКОМБИНАНТНЫХ ШТАММОВ-ПРОДУЦЕНТОВ ПРОТЕКТИВНОГО АНТИГЕНА 4.1. Передача гибридной плазмиды pUB110PA-l в бесплазм и д-ные бациллярные штаммы 4.2. Определение уровней продукции ПА рекомбинатными штаммами на основании иммунохимических методов исследования 4.3. Определение стабильности рекомбинантных штаммов in vitro и in vivo ГЛАВА 5. ОЦЕНКА ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ РЕКОМБИНАНТНЫХ ШТАММОВ 5.1. Подбор оптимальной иммунизирующей дозы для лабораторных животных 5.2. Сравнительное изучение индексов иммунитета сконструированных штаммов-продуцентов протективного антигена и вакцинных культур

Введение Диссертация по биологии, на тему «Генетическое конструирование штаммов — продуцентов протективного антигена Bacillus anthracis»

Заключение Диссертация по теме «Микробиология», Кудрявцева, Ольга Михайловна

Библиография Диссертация по биологии, кандидата биологических наук, Кудрявцева, Ольга Михайловна, Саратов

1. Азизбекян P.P., Богданова Т.Л., Миненкова И.Б. и др. Характеристика выделенных из почвы фагов спорообразующих бактерий // Микробиология. -1977. №3. — С.554-559. 2. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л.: Медгиз, 1962. — 180 с. 3. Бакулов И. А. Гаврилов В.А. Оценка эффективности 10-летнего применения вакцины против сибирской язвы животных из штамма 55-ВНИИ ВиМ // Ветеринария. 1994. — №8. — С. 11 -15. 4. Безносов М. В., Петров Г. А., Соркин Ю. И. и др. Выделение поверхностного антигена вегетативных клеток Bacillus anthracis СТИ-1 и изучение его протективных свойств // Журн. микробиол. эпидемиол. иммунобиол. 1997.- № 1.-С.9- 13. 5. Богуш В.Г., Смирнов В.В., Ребентиш Б.А., Пермогоров В.М., Азизбекян P.P. Физико-химические свойства некоторых фагов Bacillus thuringiensis II Mo-лек. биол. 1977. — Т.П. — №4. — С.901-908. 6. Васильев Н.Т., Пименов Е.В., Кожухов В.В. и др. Перспективы создания сибиреязвенных вакцин нового поколения // Иммунология. 1999. — №3. — С.5-8. 7. Гаврилов С.В. Трансдукция у возбудителя сибирской язвы: Дисс.канд. мед. наук. Саратов, 1990. — 154с. 8. Гинсбург Н.Н. Живые вакцины. М.: Медицина, 1969. 336с. 9. Н.Гинсбург Н.Н. Копылов Н.Ф. Итоги применения сибиреязвенной вакцины 10. СТИ за время с августа 1941 г. по осень 1944 г. ( по анкетным материалам с мест на 1 апреля 1945 г.) Сб. работ НИИЭГ Красной армии. М., 1946. — С. 194-207. 11. Глик Б., Пастернак Д. Молекулярная биотехнология. Принципы и применение: Пер. с англ. М.: «Мир», 2002. — 589 с. 12. Гловер Д. Клонирование ДНК. Методы: Пер. с англ. М.: «Мир», 1988. — 538 с. 13. Голубков В.И., Бойцов А.С., Гаупалова Т.В., Тотолян А.А. Гетерологичная трансформация плазмидами стрептококков и стафилококков // Молек. ген., микробиол. и вирусол. 1984. — №4. — С.7-10. 14. Еременко Е.И. Биологические и популяционные аспекты патогенности Bacillus anthracis: Дисс. д-ра. мед. наук. Ставрополь, 1997. — 275с. 15. Еременко Е.И. Выделение ауксотрофных мутантов вакцинного штамма СТИ-1 сибиреязвенного микроба//Особо опасные инфекции на Кавказе.-Сб. научн. трудов. Вып.1. Ставрополь, 1985. — С. 106-108. 16. Еремин С.А., Никифоров А.К., Костюкова Т.А., Микшис Н.И. Изучение способности штаммов возбудителя сибирской язвы к редукции метиленово-го синего // Журн. микробиол. 1999. — № 4. — С. 91-92. 17. Еремин С.А., Дроздов И.Г., Никитин А.Н. и др. Высокоэффективная элек-тростимулируемая трансформация Y. pestis EV и В. anthracis II Всес. н.-и. противочум. ин-т «Микроб». Саратов, 1990(a). -15 с. 18. Еремин С.А., Ежов И.Н., Костюкова Т.А. и др. Конструирование и изучение штаммов сибиреязвенного микроба, обладающих различным набором собственных плазмид // Молек. ген., микробиол. и вирусол. 1989. — №10. -С.35-38. 19. Ипатенко Н.Г. Сибирская язва. М.: Колос, 1996. — 335с. 20. Лефковитс И., Пернис Б. Иммунологические методы исследований: Пер. с англ. М.: Мир, 1983. — 349с. 21. Лопаткин О.Н., Буравцева Н.П., Солдатова Ю.В. Питательные потребности сибиреязвенного микроба // Микробиол., эпидемиол. и профилакт. особо опасных инф. Ставрополь, 1974. — С.32-35. 22. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Молекулярное клонирование: Пер. с англ. М.: «Мир», 1984. — 480 с. 23. Микшис Н.И., Еремин С.А., Болотникова М.Ф. Корреляция вирулентности Bacillus anthracis с экпрессией признаков, кодируемых хромосомными генами //Молек. ген., микробиол. и вирусол. 1999(6). — №4. — С.25-28. 24. Микшис Н.И., Еремин С.А., Шевченко О.В. и др. Влияние спонтанных хромосомных мутаций на вирулентность возбудителя сибирской язвы: Матер, юбилейной науч. конф., посвящ. 70-летию НИИ микроб. МО РФ.- Киров, 1998. С.165-166. 25. Микшис Н.И., Корсакова А.Ю., Болотникова М.Ф. и др. Продукция белков S- слоя штаммами Bacillus anthracis II Биотехнология. 2004. — №5. — С.22-32. 26. Микшис Н.И., Степанов А.С., Шевченко О.В., Еремин С.А. Изучение феномена внутриштаммовой гетерогенности возбудителя сибирской язвы // Журнал микробиологии. 1999(a).- №3. — С.78-79. 27. Найманов П.И., Голубинский Е.П., Соркин Ю.И., Кондратов В.В. Потребление in vitro аминокислот клетками Bacillus anthracis // Журн.микро-биол., эпидемиол.и иммунобиол. 1986. — №4. — С.30-34. 28. Найманов П.И. Особенности питания и биологическая характеристика Bacillus anthracis: Дисс. канд. мед. наук. Иркутск, 1987. — 124 с. 29. Онищенко Г.Г., Васильев Н.Т., Литусов Н.В., и др. Сибирская язва: актуальные аспекты микробиологии, эпидемиологии, клиники, диагностики, лечения и профилактики. М., 1999. — 447с. 30. Основные требования к вакцинным штаммам сибиреязвенного микроба для иммунизации людей (МУ 3.3.1.1112-02): Методические указания. М., 2002. -47с. 31. Пименов Е.В., Дармов И.В., Васильев Н.Т. и др. Состояние вопроса и перспективы разработки вакцин против сибирской язвы // Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2002. — №5. — С.42-46. 32. Прозоров А.А. Генетическая трансформация и трансфекция. М.: «Наука»,1980.-247с. 33. Пузанова О.Б. Криотрансформация возбудителя сибирской язвы плазмидной ДНК: Дисс. канд. мед. Наук. Саратов, 1990. — 147с. 34. Регламент производства № 831 -98 на вакцину сибиреязвенную живую. 35. Рудченко О.Н., Лихачева Н.А., Тимакова Н.В. Физиология компетентности у бактерий // Журн. микробиол. эпидемиол. и иммунобиол. 1977. — №3. -С. 19-26. 36. Смирнова Т.А., Богданова Г. Л., Гальперин М.Ю. и др. Гомологичная и гете-рологичная трансцепция Сгу+ плазмид Bacillus thuringiensis // Молекул, генетика, микробиол., вирусол. 1987. — №10. — С.23-27. 37. Степанов А .С. Разработка основ генетического анализа возбудителя сибирской язвы: Дис. докт. мед. наук. Саратов, 1992. — 333 С. 38. Степанов А.С., Гаврилов С.В., Пузанова О.Б. и др. Трансдукция плазмид бактериофагом СР54 Bacillus anthracis // Молекул, генетика, микробиол. вирусол. 1989 (а). -№.1 — С. 14-19. 39. Степанов А.С., Пузанова О.Б., Гаврилов С.В. и др. Трансдукционная и ко-ньюгационная передача плазмиды рХ02 Bacullus anthracis // Молекул, генетика, микробиол., вирусол. 1989 (б).- №12. — С.39-43. 40. Тедиков В.М., Добрица А.П. Клонирование и экспрессия детерминанты протективного антигена Bacullus anthracis в клетках Escherichia coli, Bacullus subtilis и Bacullus anthracis // Молекул, генетика, микробиол., вирусол. -1993.- N2. С.13-16. 41. Терентьев Ф.А. Сибирская язва животных и борьба с ней. М.: «Сельхозгиз»,1946. 62 с. 42. Тучков И. В., Куличенко А.Н., Норкина О.В., Дроздов И.Г. Детекция штаммов сибиреязвенного микроба с использованием полимеразной цепной реакции // Генет., микробиол., и совершенствование методов лаб. диагн. особо опасных инф. Саратов, 1991. — С.89-91. 43. Фримель Г. Иммунологические методы: Пер. с англ. М.: «Медицина», 1987. — 472 с. 44. Хайкинсон М.Я., Рабинович П.М., Степанов А.И. Модели трансформации Bacullus subtilis плазмидной ДНК // Докл. АН СССР. М. — 1982(6). — Т. 265. -№5.-С. 1264-1267. 45. Хайкинсон М.Я., Рабинович П.М., Степанов А.И. Роль прямых и инвертируемых повторов в трансформации Bacullus subtilis плазмидной ДНК // Докл. АН СССР. 1982(a). Т. 265. № 4. С.975-978. 46. Цыганкова О.И., Буравцева Н.П. Некоторые данные по протеолитической активности штаммов возбудителя сибирской язвы // Особо опасные инф. на Кавказе: Тезисы, докл. 6-ой краевой науч. конф. Ставрополь, 1987. -С.249-250. 47. Цыганкова О.И. Гемолитическая и протеолитическая активность сибиреязвенного микроба: Дисс.канд. мед. наук. Ставрополь, 1993. — 179с. 48. Черкасский Б.Л. Эпидемиология и профилактика сибирской язвы. М.: «Ин-терсэн», 2002. 384с. 49. Шляхов Э.Н. Эпидемиология, диагностика и профилактика сибирской язвы. Кишинев: Картя Молдовеняскэ, 1960. 116с. 50. Щелкунов С. Н. Генетическая инженерия: Учеб. пособие: В 2 ч. Новосибирск: изд-во Новосиб. Ун-та, 1994. — 304с. 51. Ясинский А.А., Котова Е.А., Перевощикова А.А., и др. Эпидемиологическая ситуация в Российской Федерации в 2004 г // Эпидемиология, вакцинопро-филактика. 2005. — №2(21). — С.6-13. 52. Aloni-Grinstein R., Gat О., Altboum Z. et al. Oral spore vaccine based on live attenuated nontoxinogenic Bacillus anthracis expressing recombinant mutant protective antigen // Infect, and Immun. 2005 — V. 73. — № 7. — P.4043-4053. 53. Azhar A. M., Singh S., Anand K. P., Bhatnagar R. Expression of protective antigen in transgenic plants: a step towards edible vaccine against anthrax // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2002. — V. 299. — № 3 — P.345-351. 54. Baillie L., Moir A., Manchee R. The expression of the protective antigen of Bacillus anthracis in Bacillus subtilis // Journal of Applied Microbiology. 1998(b). -Vol. 84. №5. — P.741-746. 55. Baillie L.W., Moore P., McBride B.W. A heat-inducible Bacillus subtilis bacteriophage phi 105 expression system for the production of the protective antigen of Bacillus anthracis // FEMS Microbiol. Lett. 1998(a).- Vol. 163.- №1.- P.43-47. 56. Balassa G. Biochemical genetics of bacterial sporulation I. Unidirectional pleiotropic interactions among genes controlling sporulation in Bacillus subtilis // Mol. and Gen. Genet. 1969. — №104. — P. 73 — 103. 57. Barnard J.P., Friedlander A.M. Vaccination against anthrax with attenuated recombinant strains of Bacillus anthracis that produce protective antigen // Infect, and Immun. 1999. Vol. 67. — № 2. — P.562-567. 58. Bartkus J.A., Leppla S.H. Transcriptional regulation of the protective antigen of Bacillus anthracis I I Infect, and Immun. 1989. — V.57. — P.2295-2300. 59. Battisti L., Green B.D., Thorne C.B. Mating system for transfer of plasmids among Bacillus anthracis, Bacillus cereus and Bacillus thuringiensis // J.Bacte-riol. 1985. — V.162. — №2. — P.543-550. 60. Beal F.A., Taylor M.J. Thorne C.B. Rapid lethal effect in rats of a third component found upon fractionating the toxin of Bacillus anthracis 11 J.Bacteriol. -1962. V.83. — P.1274-1280. 61. Birnboim H.C., Doly I. A rapid alkaline extraction procedure for screening recombinant plasmid DNA//Nucleic Acids Res. 1979. — V.7. — P.1513. 62. Bourgogne A., Drisdale M., Hilsenbeck S.G. et al. Global effect of virulence gene regulators in a Bacillus anthracis strain with both virulence plasmid // Infect, and Immun. 2003. — V.71. — №.5. — P.2736-2743. 63. Brigidi P., Rossi E., Bertarini M. Genetic transformation of intact cells of Bacillus subtilis by electroporation // FEMS Microbiol. Let. 1990. — V.67. — P.135-138. 64. Brassier F., Weber-Levy M., Mock M., Sirard J. Protective antigen-mediated antibody response against a heterologous protein produced in vivo by Bacillus anthracis // Infect.Immun. 2000. — Vol. 68. — P. 1781-1786. 65. Bush L.M, Abrams B.H, Beall A. et al. Index case of fatal inhalational anthrax due to bioterrorism in the United States // N. Engl. J. Med. 2001. — V. 345. -P.1607-1610. 66. Cataldi A., Labruiere E. Genetic study of toxin expression in Bacillus anthracis, p.60-61. In: P.C.B.Turnbull (ed.), Proc. Int. Workshop on Anthrax. Salisbury Med. Bull., Winchester, England. 1989. 67. Cataldi A., Labruiere E. Мок M. Construction and characterization of a protective antigen deficient Bacillus anthracis strain // Mol. Microbiol. — 1990. — V. 4. -№ 7. — P.l 111-1117. 68. Chattergee B.R., Williams R.P. Formation of spheroplasts from Bacillus anthracis 11 J. Bacteriol. -1965. V.89. — P.ll28-1133. 69. Chauhan V., Singh A., Waheed S.M. et al. Constitutive expression of protective antigen gene of Bacillus anthracis in Escherichia coli // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2001. — Vol. 283. — № 2. — P.308-315. 70. Chauvaux S., Matuschek M., Begum P. Distinct affinity of binding sites tor S-lay-er homologous domains in Clostridium thermocellum and Bacillus anthracis cell envelopes // J. Bacteriol. 1999. — V.181. — P.2455 -2458. 71. Chu H. P. Variation of Bacillus anthracis with special reference to non-capsulated avirulent variant//J.Hygienc.- 1952. V.50. — P.433-444. 72. Clements M.O., Moir A. Role of the gerl operon of Bacillus cereus 569 in the response of spores to germinants // J. Bacteriol. 1998. — V.180. — P.6729-6735. 73. Cohen S., Mendelson I., Altboum Z. et al. Attenuated nontoxinogenic and nonen-capsulated recombinant Bacillus anthracis spore vaccines protect against anthrax // Infect, and Immun.- 2000.- Vol 68. №8. — P.4549-4558. 74. Connors M. J., Howard, S., Hoch, J. A., Setlow P. Determination of the chromosomal map location of four Bacillus subtilis genes which code for a family of small, acid-soluble spore proteins // J. Bacteriol. 1986. — V.166.- P.412-416. 75. Corfe B.M., Sammons R.L., Smith D.A., Mauel C. The gerB region of the Bacillus sublilis 168 chromosome encodes a homologue of the gerA spore germination operon. //Microbiology. 1994. — V.140. — P.471-478. 76. Coulson N.M., Fulop M., Titball R.W. Effect of different plasmids on colonization of mouse tissues by the aromatic amino acid dependent Salmonella typhimurium SL 3261 // Microb. Pathog. 1994. — Vol. 16. — № 4. — P.305-311. 77. Dai Z., Sirard J.-C., Mock M., Kochler T.M. The atxA gene product activates transcription of the anthrax toxin genes and is essential for virulence // Mol. Microbiol. -1995. V.16. — P.1171-1181. 78. Davies J. A major epidemic of anthrax in Zimbabwe. // Cent. Afr. J. Med. 1983. — Vol. 29. — P. 8-12. 79. Davies J. A major epidemic of anthrax in Zimbabwe. The spread of the epidemic in Matabeleland, Midlands and Mashonaland provinces during the period November, 1978 to October, 1980 // Central Afric. J. Med. 1982. — Vol. 28. -№12. -P.291-298. 80. Dretzen G., Bellard M., Sasson-Corsi P., Chambon P. A reliable method for the recovery of DNA Fragments from agarose and acrylamide gels // Anal. Biochem. -1980.-V.112.-P.295-299. 81. Escuer V., Duflot E., Sezer O. et al. Structure-homology between virulence-associated adenylate cyclases // Gene. 1988. — V.71. — P.293-298. 82. Etienne-Toumelin I., Sirard J.-C., Duflot E. et al. Characterization of the Bacillus anthracis S-layer: cloning and sequencing of the structural gene. // J. Bacteriol. -1995. V.177. — P.614-20. 83. Ezzell J.W. Anthrax. Army Med. Research Inst, of Infect. Diseases. Fort Dctrick, 984, 84p. 84. Ezzel J.W., Abshire T.G. Immunological analysis of cell-associated antigenes of Bacillus anthracis // Infcc. and Immun. 1988. — V.56. — P.349 — 356. 85. Farchaus J., Ribot W., Downs M. et al. Purification and Characterization of the Major Surfacc Array Protein from the Avirulent Bacillus anthracis Delta Sterne-1 // J. Bacteriol. 1995. — Vol. 177. — № 9. — P. 2481-2489. 86. Finlay B.B., Falkow S, Common themes in microbial pathogenicity // Microbiol. Rev. 1989. — V.53. — P.210-230. 87. Fish D.C., Mahlandt B.G., Dobbs J.P., Linkoln R.E. Purification and properties of in vitro produced anthrax toxin components // J.Bacteriol. 1968. — V.95. — P.907-918. 88. Fouet A., Mock M. Differential influence of the two Bacillus anthracis plasmids on regulation of virulence gene expression // Infect, and Immun. 1996. — V.64. -P.4928-4932. 89. Fouet A., Namy 0., Lambert G. Characterization of the operon encoding the alternative
Информация о работе